在奶牛場(chǎng)，馬波沙星因?yàn)槌痰臈壞唐冢?.5天）和休藥期（3-6天），大大減少泌乳牛感染性疾病的損失，特別是用在乳房炎和肺炎的治療上。同時(shí)，由于馬波沙星屬于喹諾酮類抗生素，一些人對(duì)其在牛奶里的殘留提出質(zhì)疑，就此，歐盟藥物管理局（EMA）對(duì)馬波沙星的藥物殘留檢測(cè)及安全性做了詳細(xì)論述，證明其在泌乳牛上使用，對(duì)奶牛和人都是安全的。

簡(jiǎn)而言之，在歐洲，NOAEL（No observed adverse effect level, 無(wú)可見(jiàn)有害作用水平）和ADI（Acceptable Daily Intake,每日允許攝入量）被用于評(píng)估藥物毒性和健康風(fēng)險(xiǎn)。NOAEL由大量的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究確定，而ADI則全面考慮安全因素和不確定因素，在NOAEL的最低值基礎(chǔ)上進(jìn)行計(jì)算。通常為最敏感的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物NOAEL的1/100，即100倍安全系數(shù)，此數(shù)值是通過(guò)考慮不同的動(dòng)物種類和不同的毒物動(dòng)力學(xué)和毒效學(xué)，同時(shí)假設(shè)人比實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)受試物敏感10倍，人群內(nèi)敏感性差異為10倍。

所以： ADI=長(zhǎng)期NOAEL（最低值）/100

對(duì)于馬波沙星，我們已經(jīng)獲得長(zhǎng)期動(dòng)物毒性研究的結(jié)果：

生殖毒性（鼠）：NOAEL=85mg/kg 體重/天

慢性毒性（鼠）：NOAEL=4 mg/kg 體重/天

慢性毒性（狗）：NOAEL=4 mg/kg 體重/天

致畸性（懷孕兔子）：NOAEL=30 mg/kg 體重/天

因此，如果只考慮安全因素，常規(guī)ADI=4 mg/kg 體重/天/100=0.04 mg/kg 體重/天=40ug/kg 體重/天，由于歐盟規(guī)定馬波沙星的限量殘留標(biāo)準(zhǔn)是75ug/kg，這也就是說(shuō)一個(gè)人需要每天攝入超過(guò)自己體重1/2的牛奶，才有可能超過(guò)常規(guī)ADI。

如果考慮到抗生素殘留對(duì)腸道微生物區(qū)系的影響，ADI則按照如下公式計(jì)算：

那么，微生物ADI=4.5ug/kg體重。

基于此，歐盟采用4.5ug/kg體重的標(biāo)準(zhǔn)，確定最大殘留限量（MRLs），相應(yīng)的休藥期和棄奶期的計(jì)算均是基于保證低于此攝入水平（4.5ug/kg體重）。目前休藥期和棄奶期的標(biāo)準(zhǔn)為：按照每1kg體重8mg給藥，休藥期3日，棄奶期72 小時(shí)；按照每1kg體重2mg給藥，休藥期6日，棄奶期36 小時(shí)。

在中國(guó)：馬波沙星的限量殘留檢測(cè)限為3-5 ug/kg，比歐盟的標(biāo)準(zhǔn)嚴(yán)格15倍之多。由于微生物ADI是4.5ug/kg，這也就是說(shuō)，每人每天攝入與自己體重相當(dāng)?shù)呐Ｄ?，才有可能超過(guò)微生物ADI。如果只考慮安全因素（常規(guī)ADI=40ug/kg體重），需要每天攝入約為自己體重10倍的牛奶，才有可能超過(guò)ADI。

以下為歐盟藥品管理局對(duì)馬波沙星的總結(jié)報(bào)告（摘錄）：

1. 馬波沙星是一種氟喹諾酮類抗生素，多見(jiàn)于口服或者注射途徑，用于治療牛，包括奶牛、豬的呼吸道疾病，注射治療乳房炎-子宮炎-無(wú)乳綜合征，推薦劑量一般為每天2mg/kg體重，連續(xù)5天。

2. 馬波沙星通過(guò)抑制細(xì)菌的DNA轉(zhuǎn)移酶起作用。

3. 馬波沙星經(jīng)口或注射途徑給藥吸收良好。Cmax值和AUC與注射劑量成正比?？诜锢枚仍诙喾N動(dòng)物中均接近100%。在組織中廣泛分布。在小鼠和狗中，組織（例如肺、肝、和腎臟）藥物的濃度比血漿中的濃度高。在人、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和豬，馬波沙星與血漿蛋白輕微結(jié)合（10%），在牛結(jié)合略高（約為30%）。多經(jīng)尿液途徑排出。在所有的物種中，以原型形式存在的馬波沙星是組織和排出物中的主要成分。一些馬波沙星結(jié)合物的殘留以二甲基-和N-氧化物的形式出現(xiàn)。生物轉(zhuǎn)化的程度非常小，在物種間差異不明顯。

4. 馬波沙星急性口服毒性低，急性口服LD50范圍值為1781mg/kg體重（雄性ICR小鼠）至3772mg/kg體重（雄性斯普拉格-杜勒鼠）。急性皮下LD50范圍值為972 mg/kg體重（雄性ICR小鼠）至2094 mg/kg體重（雄性斯普拉格-杜勒鼠）。中毒表現(xiàn)包括活力降低，顫抖和驚厥。皮下注射僅有輕微皮膚和眼睛刺激。

5. 在一個(gè)實(shí)驗(yàn)中，對(duì)小鼠進(jìn)行連續(xù)13周的重復(fù)注射，馬波沙星通過(guò)飼料攝入，濃度按照0,4,50和600mg/kg體重每天提供。在最高濃度600mg/kg體重每天觀察到死亡率的增加，死亡與阻塞性尿路病有關(guān)。兩個(gè)接收高劑量的小鼠腎臟中發(fā)現(xiàn)了透明蛋白顆粒。在50-600mg/kg體重，馬波沙星對(duì)雄性小鼠的繁殖器官有毒性作用，導(dǎo)致睪丸和附睪的重量下降，睪丸管萎縮，精子減少和精索肉芽腫。給與50-600mg/kg體重同樣引起關(guān)節(jié)病。對(duì)睪丸的影響和關(guān)節(jié)病同樣也在其它動(dòng)物給予600mg/kg體重的組觀察到，實(shí)驗(yàn)組在實(shí)驗(yàn)的后六周未在飼料中給藥。NOAEL（No observed adverse effect level, 無(wú)可見(jiàn)有害作用水平）為4mg/kg體重。

6. 在一個(gè)實(shí)驗(yàn)中，對(duì)成年狗進(jìn)行連續(xù)13周的口服給藥1,4,40mg/kg體重（明膠膠囊）。文獻(xiàn)中典型的喹諾酮類藥物引起的變化在40mg/kg體重時(shí)觀察到。睪丸小管萎縮和精索肉芽腫在40mg/kg的組中各觀察到1例（總數(shù)大于4例）。NOAEL（No observed adverse effect level, 無(wú)可見(jiàn)有害作用水平）為4mg/kg體重。

7. 在一個(gè)實(shí)驗(yàn)中，對(duì)未成年狗連續(xù)13周給藥，大于6mg/kg體重，未觀察到任何藥物影響。

8. 在一個(gè)致畸研究中，對(duì)懷孕兔子在其妊娠期的6-18天口服給藥，分別按照10,30,80mg/kg體重給藥。在所有的劑量中均未觀察到致畸效果。在80mg/kg體重組，觀察到胎兒毒性，導(dǎo)致骨化延遲；針對(duì)胎兒毒性的無(wú)作用劑量是30mg/kg體重。母體毒性在30mg/kg和80mg/kg的組觀察到，但未在10mg/kg的組觀察到。

9. 在一個(gè)針對(duì)小鼠的致畸實(shí)驗(yàn)中，對(duì)懷孕小鼠在其妊娠期的6至15天分別口服給藥10, 85或者700mg/kg體重。均未觀察到致畸作用。在700mg/kg組觀察到胎兒毒性，導(dǎo)致再吸收比例增加，這與產(chǎn)仔數(shù)減少一致，另外還可造成胎兒體重降低。針對(duì)胎兒毒性的NOAEL（No observed adverse effect level, 無(wú)可見(jiàn)有害作用水平）為85mg/kg體重。母體毒性僅在85和700mg/kg體重組觀察到。

10. 在一個(gè)二次實(shí)驗(yàn)中，分別對(duì)小鼠逐日飼喂含有10,70或者500mg/kg的體重的飼料。在500mg/kg體重組，觀察到明顯的毒性癥狀，雄性的繁殖能力受到損傷。10周恢復(fù)期后顯示此效果為可逆的。繁殖組織未進(jìn)行微觀檢查，因此最終影響未知。對(duì)移植小鼠影響相對(duì)減少，幼鼠個(gè)體和體重較小，在500mg/kg組，觀察到幼鼠死亡率增加，性成熟延遲。在70mg/kg組相似但程度較輕。NOAEL（No observed adverse effect level, 無(wú)可見(jiàn)有害作用水平）為10mg/kg體重。

11. 在鼠傷寒沙門氏菌基因缺失TA102株，馬波沙星在顯性和隱性代謝活性方面，具有誘變育種作用。另外六株菌種的實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陰性。在釀酒酵母也觀察到基因轉(zhuǎn)換、基因突變和有絲分裂交換。馬波沙星誘導(dǎo)點(diǎn)位突變?cè)谥袊?guó)小鼠V79細(xì)胞中，在中度毒性劑量水平，僅表現(xiàn)在顯性代謝活性中。在一個(gè)人淋巴細(xì)胞的體外DNA合成實(shí)驗(yàn)中和一個(gè)體外染色體畸變實(shí)驗(yàn)中，結(jié)果均為陰性。在一個(gè)小鼠骨髓的體外微核實(shí)驗(yàn)和小鼠肝細(xì)胞的體外DNA合成實(shí)驗(yàn)中，均沒(méi)有觀察到基因誘導(dǎo)作用。結(jié)論為馬波沙星在體內(nèi)沒(méi)有基因毒性。

12. 在致癌性方面沒(méi)有數(shù)據(jù)。這個(gè)缺失通過(guò)對(duì)比其它氟喹諾酮類藥物與馬波沙星的基因突變實(shí)驗(yàn)等結(jié)果進(jìn)行調(diào)整。結(jié)果類似。多種喹諾酮類的數(shù)據(jù)顯示與原核酶相比，其對(duì)真核生物拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ的抑制作用低100倍。其它的氟喹諾酮類藥物均無(wú)致癌作用。因此結(jié)論為沒(méi)有任何理由去懷疑馬波沙星的致癌性。

13. 馬波沙星在食品加工行業(yè)對(duì)微生物的潛在影響通過(guò)酸奶的抑制試驗(yàn)進(jìn)行了調(diào)查。耐受臨界值為1.6ug/ml，對(duì)嗜熱鏈球菌和保加利亞乳桿菌的臨界值分別為1.6ug/ml 和50ug/kg。

14. 0至0.04mg/kg體重的毒性ADI被測(cè)算，在一個(gè)為期13周的實(shí)驗(yàn)中，對(duì)狗給于100倍的安全劑量，即4mg/kg體重來(lái)進(jìn)行測(cè)試。

15. 由于ADI需要足夠低以減少任何藥理學(xué)、微生物學(xué)或者其它生理影響的可能性，同時(shí)考慮抗生素殘留對(duì)人類腸道微生物區(qū)系的影響。

針對(duì)微生物風(fēng)險(xiǎn)的評(píng)估，采用獸藥委員會(huì)（CVMP）推薦的公式：
ADI=（MIC50的幾何平均數(shù)*CF2*每天的糞便取樣量（150ml）/CF1）/（口服后的有效劑量*體重）
體內(nèi)的MIC值針對(duì)人腸道內(nèi)分離的細(xì)菌進(jìn)行確定，也可通過(guò)模擬胃腸道環(huán)境（肉或奶）下確定。在牛奶環(huán)境下，大腸桿菌的MIC幾何平均數(shù)為0.536ug/ml。
基于以上公式，微生物學(xué)ADI計(jì)算如下。
ADI=(0.536*1/1*150)/(0.3*60)=4.5ug/kg體重=270ug/人

相關(guān)假設(shè)如下：
CF1=1采用最敏感、主要的微生物獲得的MIC
CF2=1模擬腸道環(huán)境下的MIC
150g為每日的糞便取樣量
0.3為口服后腸道菌群的有效劑量

16. 在反芻犢牛和未反芻犢牛上對(duì)比了馬波沙星的藥動(dòng)學(xué)，皮下注射后，藥物的吸收和消除均在未反芻犢牛中較低，反應(yīng)了未反芻犢牛有更高的組織殘留濃度。

17. 吸收和消除速度均比皮下注射慢。未反芻犢牛皮下注射和肌肉注射的生物利用度接近100%。對(duì)泌乳牛進(jìn)行肌肉注射和皮下注射后，藥物被迅速吸收，生物利用度接近100%。

18. 用放射性同位素標(biāo)記的馬波沙星，對(duì)未反芻犢牛進(jìn)行皮下注射，2mg/kg體重，連續(xù)5天，來(lái)研究抗生素在體內(nèi)的殘留衰減。犢牛被分為四組，在不同的時(shí)間點(diǎn)被屠宰。組織中的總殘留通過(guò)閃爍記數(shù)，馬波沙星的殘留則通過(guò)高效液相色譜來(lái)測(cè)定。所有組織包括注射部位的抗生素殘留均快速衰減。肌肉和脂肪當(dāng)中的馬波沙星衰減與總殘留的變化一致。在肝臟，最后一次給藥后4小時(shí)，約90%的總殘留為馬波沙星。最后一次給藥后96小時(shí)，這個(gè)比例大約降至40%。在腎臟當(dāng)中此數(shù)值分別約為95%和60%。肝臟當(dāng)中的馬波沙星殘留通過(guò)高效液相色譜測(cè)定，從4小時(shí)后的1327-3105ug/kg降到96小時(shí)后的19-36ug/kg。在同一時(shí)間，腎臟的殘留從3602-4782ug/kg降至16-23ug/kg，在注射部位，從2985-4410ug/kg降至15-25ug/kg，脂肪樣品中，從504-2023ug/kg降至低于8.5-30ug/kg。注射192小時(shí)后，馬波沙星的殘留在大部分組織中的殘留低于檢測(cè)限（8.5ug/kg）。

19. 對(duì)未反芻的犢牛進(jìn)行肌肉注射馬波沙星，馬波沙星采用市面上的商業(yè)產(chǎn)品及配方，劑量為2mg/kg體重。四頭犢牛分別在不同的時(shí)間段被屠宰。肝臟中的殘留從注射后48小時(shí)的30-198ug/kg，降至96小時(shí)后的37-61ug/kg。在同一時(shí)間點(diǎn)，腎臟中的殘留從53-164 ug/kg降至47-111 ug/kg；在肌肉中，從25-65 ug/kg降至27-44ug/kg；在注射部位，從25-61 ug/kg降至25-43 ug/kg。在所有脂肪樣品中殘留均低于25 ug/kg。最后一次給藥后192小時(shí)，殘留僅在一個(gè)腎臟樣品中檢測(cè)到，定量檢測(cè)限為25ug/kg。

20. 對(duì)3頭泌乳牛連續(xù)5天皮下給藥，劑量為2 mg/kg的放射性標(biāo)記的馬波沙星。收集牛奶樣品，并在不同的時(shí)間點(diǎn)對(duì)牛進(jìn)行屠宰，牛奶和組織中的總殘留通過(guò)閃爍計(jì)數(shù)法進(jìn)行測(cè)定，馬波沙星的殘留通過(guò)高效液相色譜測(cè)定。在牛奶中，總殘留的73-89%為馬波沙星。

21. 在另一個(gè)研究中，8頭泌乳牛，包括4頭泌乳早期的高產(chǎn)牛和4頭泌乳晚期的低產(chǎn)牛，按照2mg/kg體重給藥，皮下注射商業(yè)產(chǎn)品的馬波沙星。注射后，首次擠奶的藥物殘留為180-679ug/L。第三次擠奶，殘留降至10-34ug/L。在第五次擠奶采集的所有牛奶樣品均低于檢測(cè)限（10 ug/kg）。

22. 對(duì)牛和豬的組織以及牛奶中的殘留，常規(guī)檢測(cè)方法均是基于紫外線檢測(cè)的高效液相色譜。此方法使用氧氟沙星作為內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)。在高效液相色譜條件下，環(huán)丙沙星、達(dá)氟沙星和恩諾沙星的殘留不互相干擾。此方法準(zhǔn)確性和敏感性均可接受。定量檢測(cè)，在牛肝臟和豬腎臟中為15 ug/kg；牛腎臟和脂肪為10ug/kg；牛肌肉、豬肝臟，皮膚和脂肪以及肌肉為5 ug/kg；牛奶為1 ug/kg。

總結(jié)

1.建立了微生物學(xué)ADI為4.5ug/kg體重（例如，270ug/人）。

2.確定馬波沙星在牛和豬中的殘留衰減數(shù)據(jù)。

3.經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的殘留監(jiān)測(cè)方法得以確定。

獸醫(yī)藥品委員會(huì)建議馬波沙星的殘留參照法規(guī)委員會(huì)（EEC）的2377/90號(hào)文件的附表I，如下表：

化藥活性物質(zhì)	殘留標(biāo)記物	動(dòng)物種類	最小殘留量（MRLs）	靶器官
馬波沙星	馬波沙星	牛	150ug/kg 50ug/kg 150ug/kg 150ug/kg 75ug/kg	肌肉 脂肪 肝臟 腎臟 牛奶

馮軍科 翻譯